Reference : Faisabilité de la PCR dans la détection du développement de Toxoplasma gondii en culture...
Scientific congresses and symposiums : Poster
Human health sciences : Immunology & infectious disease
Human health sciences : Laboratory medicine & medical technology
http://hdl.handle.net/2268/80606
Faisabilité de la PCR dans la détection du développement de Toxoplasma gondii en culture cellulaire MRC5.
French
[en] PCR faisability for the detection of Toxoplasma gondii development in MRC5 cell cultures
Chetaille, Eric [Centre Hospitalier Universitaire d'Amiens - CHU d'Amiens > Laboratoire > Parasitologie-Mycologie > >]
Hayette, Marie-Pierre mailto [Centre Hospitalier Universitaire d'Amiens - CHU d'Amiens > Laboratoire > Parasitoogie-Mycologie > >]
Puy, H. [Centre hospitalier universitaire Louis Mourier, Paris > Laboratoire de biochimie et biologie moléculaire, > > >]
Biendo, M. [Centre Hospitalier Universitaire d'Amiens - CHU d'Amiens > Parasitologie-Mycologie > > > >]
Carme, Bernard [Centre Hospitalier Universitaire d'Amiens - CHU d'Amiens > Parasitologie-Mycologie > > > >]
Jun-1994
Yes
No
National
Congrès de la société française de parasitologie
1-2 juin 1994
Société française de parasitologie
Toulouse
France
[en] Toxoplasma ; MRC5 ; in vitro cultures ; PCR ; Detection
[en] OBJECTIF
Etudier la faisabilité de la technique PCR pour la détection du développement de Toxoplasma
gondii sur milieu cellulaire à partir des culots et des surnageants de cultures sur fibroblastes
humains MRCS.
METHODES
Les surnageants de culture et les cellules correspondant à différents inoculums sont prélevés
après un délai variant de 24 à 120h. La technique PCR utilisée comporte une extraction à
l'iodure de sodium, l'amplification d'une séquence anonyme TGRI E spécifique de T.gondii
(191 paires de bases) et une révélation après électrophorèse sur gel d'agarose-bromure
d'éthidium en· UV. La positivité des cultures est controlée parallèlement par
immunofluorescence à l'aide d'un anticorps monoclonal antiP30 (Sanofi Pasteur) réalisée sur
les culots cellulaires des mêmes cultures.
RESULTATS
La positivité et la cohérence des résultats erl PCR (positivité de tous les inoculums > plus faible
inoculum donnant un résultat positif), aussi bien à partir des culots cellulaires que des
surnageants, démontrent la faisabilité de la méthode avec en particulier l'absence d'inhibiteur de la Taq polymérase dans le milieu de culture.
CONCLUSION
Le développement des toxoplasmes sur milieu cellulaire peut être détecté par la technique
PCR. La version sur surnageant de culture à l'intérêt de laisser intact les cellules et de
témoigner du développement réel des toxoplasmes.
Researchers ; Professionals
http://hdl.handle.net/2268/80606

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