Enhancement of the internalization of lipid nanocapsules in human glioblastoma cells: Effect of surface concentration of NFL peptide

Le glioblastome multiforme (GBM) est un des cancers les plus fatal, avec une médiane de survie de 14 mois après traitement. Il est donc nécessaire de développer de nouvelles thérapies plus efficaces.
La fonctionnalisation en surface de nanocapsules lipidiques (LNC) avec le peptide NFL-TBS.40-63 (NFL) a déjà montré une amélioration de leur internalisation dans des cellules de glioblastome murin. Le but de cette étude a été d’évaluer l’impact de la concentration en NFL présente en surface des LNC sur l’internalisation de ces dernières dans des cellules humaines de GBM U87MG. De plus, le mécanisme d’internalisation LNC-NFL a été étudié.
Une sonde fluorescente (DiA) a été encapsulé dans : des LNC (F1), des LNC avec 0.86 % et 2.58 % (w/w) de NFL adsorbé à la surface (F2 et F3 respectivement). Des analyses par cytométrie en flux (FACS) ont révélé une internalisation cellulaire de F3 plus importante de 46.4 et 6.8 fois après 30 min, de 21.6 et 6.1 fois après 1 heure, de 31.5 et 1.6 fois après 6 heures et de 7.3 et 1.1 fois après 24 heures, comparés à F1 et F2 respectivement. L’internalisation de F3 dans les cellules U87MG s’est révélée être énergie-dépendant, avec comme mécanisme principal la macropinocytose. Les cinétiques de désorption du peptides (obtenues par dialyse de F3 dans du Tris-Buffer pH 7.4 à 37°C suivi par une HPLC analytique) ont montré que 66 % de NFL restaient à la surface des LNC après 6h de dialyse, montrant une désorption lente. De plus, les trois formulations ont montré une faible activation du complément.
Du fait d’une internalisation significativement plus prononcée et rapide, F3 semble être prometteur pour améliorer l’efficacité des thérapies antiGBM. De plus, la lente désorption du NFL de la surface des LNC et la faible consommation du complément font de F3 une thérapie ciblé prometteuse contre le GBM.