L'analyse par séquençage à haut débit révèle la variabilité génétique et la pression de sélection dans différentes régions génomiques du norovirus murin durant sa réplication in vitro

Le norovirus murin (MuNoV), un virus à ARN de polarité positive appartenant à la famille des Caliciviridae, est considéré comme un modèle adéquat pour les infections humaines à norovirus, une des causes étiologiques les plus importantes dans les cas de gastroentérite épidémique ou sporadique dans le monde entier. Quatre cadres de lecture ouverts (ORF) sont décrits au sein de son génome : l’ORF1 code les protéine non structurales (NS), dont l’ARN polymérase ARN dépendante virale (RdRp) ; l’ORF2 code l’unique protéine de capside (VP1), dans laquelle sont décrites deux régions : une relativement conservée (domaine « shell ») et une autre beaucoup plus variable (domaine « protruding ») ; l’ORF3 code une protéine structurale mineure ; et l’ORF4, actuellement uniquement décrit chez les virus génétiquement apparentés au MuNoV, code un facteur de virulence. Dans cette étude, nous démontrons par séquençage à haut débit que, durant des passages successifs du MuNoV en culture cellulaire, les taux de substitution, estimés par inférences Bayésiennes, n’ont pas significativement différé au travers des cinq régions génomiques ciblées à l’exception d’une région bien précise. Ces taux étaient similaires pour quatre régions englobant des séquences partielles codant les protéines non structurales NS1-2, NS5, NS6 et NS7 (RdRp) et VP1 dans sa région conservée (incluant également l’ORF4). Dans la région codant partiellement la protéine structurale mineure, ce taux de substitution, exprimé en substitution/site/jour, a été cependant estimé être plus élevée d’au moins une unité logarithmique. La localisation précise des mutations ponctuelles détectées (substitution, délétion et insertion) est rapportée ainsi que l’augmentation ou la diminution quantitative du nombre des séquences qui les présentaient au cours de dix passages successifs en culture cellulaire. Les localisations des mutations non silencieuses ont aussi été représentées dans une modélisation tridimensionnelle de quatre des cinq régions étudiées. Ces résultats ont d’importantes implications pour différents champs de recherche sur les norovirus, spécialement en termes de diagnostic, de méthodologie de classification et d’évolution génétique.