Asociación de adhesina F17 con producción de toxinas Shiga y otros factores de virulencia en Escherichia coli de origen bovino

ASOCIACIÓN DE ADHESINA F17 CON PRODUCCIÓN DE TOXINAS SHIGA Y OTROS FACTORES DE VIRULENCIA EN Escherichia coli DE ORIGEN BOVINO
Rodríguez S1; Mercado E1; Gioffré, A2; Cataldi A2; Elizondo A1; Rossetti C2
(1) Instituto de Patobiología, CICVyA, INTA-Castelar. CC 77. Buenos Aires, Argentina.
(2) Instituto de Biotecnología, CICVyA, INTA-Castelar. CC 77. Buenos Aires, Argentina.

La adhesina F17 presenta variantes serológicas (F17a,F17b,F17c,F17d) que son expresadas por E.coli patógenos. Estos subtipos han sido detectados en bovinos con diarrea o septicemia y en ovinos septicémicos en países del hemisferio norte. F17 es altamente homóloga a fimbrias de P. mirabilis uropatógeno y H. influenzae biogr.aegyptius. En los bovinos, la expresión de F17 se ha asociado con varios factores de virulencia. En este trabajo se demuestra la presencia de fimbrias de la familia F17 en E.coli productoras de toxinas Shiga (Stx). Las cepas estudiadas provinieron de un brote de diarrea en un establecimiento de cría que afectó a 170 de un total de 600 terneros de 30-45 días. La detección de los subtipos de F17 se realizó por agluti-nación en lámina e immunodot y se confirmó por SDS-PAGE y Western blot. Las fimbrias F5 y F41 se investigaron por aglutinación en lámina. El antígeno de superficie CS31A se detectó por immunodot, confirmándose por SDS-PAGE y Western blot. Los genes que codifican para Stx (stx1, stx2) e intimina (eaeA) se detectaron por PCR, confirmándose la producción de Stx en células Vero. La producción de enterotoxina (StaP) se ensayó en ratón lactante. La serotipificación se realizó por la técnica de aglutinación. La detección de enterohemolisina (ehly) fue realizada en agar con 5% de eritrocitos lavados. Se comprobó la capacidad de colonización intestinal de las cepas F17+ por la técnica de adherencia in vitro a villi de ternero. En 7 de 9 animales estudiados se aislaron E.coli productores de F17 y/o stx+, eaeA+, ehly+. Dos cepas stx1+, eaeA+, ehly+ de los serotipos O153:H- y O159:H- expresaron fimbrias F17. Por su reactividad con sueros específicos y un peso molecular aparente de 20 kDa se las identificó como pertenecientes a los subtipos c y a, respectivamente. En el caso de la cepa del serotipo O159:H- se detectó también la presencia de una fimbria de 18.5 kDa con reactividad cruzada con antisuero F17 que podría corresponder a F17d o a una nueva variante dentro de la familia F17. El resto de los E.coli expresaron fimbrias F17 (c y a/18.5) ó bien fueron productores de Stx, correspondiendo a los patotipos O5:H-, stx1, eaeA+, ehly+; O26:H-(H11), stx2, eaeA+, ehly+; O26:H-(H11), stx1, eaeA+, ehly+; y O111:H-, stx1, eaeA+, ehly+. Todos los E.coli F17+ mostraron adherencia a villi de ternero. Ninguna de las cepas expresó los antígenos F5, F41, CS31A ni produjo toxina StaP. La adquisición de mecanismos de colonización no reportados previamente en cepas de E.coli productoras de toxinas Shiga plantea la posibilidad de la aparición de clones con un mayor perfil de virulencia en bovinos y/o humanos.