References of "Thiry, Christophe"
     in
Bookmark and Share    
Peer Reviewed
See detailEvolution de la viabilité cellulaire dans les procédés de production de ferments lactiques : effet du type de bactérie sur l'évaluation par cytométrie en flux
Delvigne, Frank ULg; Thiry, Christophe ULg; Pierart, Céline ULg et al

Conference (2011, November 29)

La cytométrie en flux est une technique permettant d'effectuer des analyses au niveau des cellules individuelles. Cette technique a été développée à l'origine pour l'analyse de cellules animales dans des ... [more ▼]

La cytométrie en flux est une technique permettant d'effectuer des analyses au niveau des cellules individuelles. Cette technique a été développée à l'origine pour l'analyse de cellules animales dans des applications à finalité médicale. Ce n'est que dans les années 90 que cette technique a été considérée dans le cadre des cellules microbiennes procaryotes et eucaryotes. Grâce à l'évolution des technologies (laser à l'état solide, progrès dans la maîtrise des micro-écoulements,…), plusieurs développeurs proposent actuellement des cytomètres en flux pour des budgets abordables (environ 30.000 euros). Cette évolution entraîne actuellement un engouement des industriels pour la mise en oeuvre de cette technique pour le suivi de l'évolution des populations microbiennes dans divers procédés : brasserie, vinaigrerie, production de starters pour la boulangerie, production de starters lactiques,… L'intérêt manifesté pour cette technique est simple à comprendre si on considère les techniques actuelles pour l'estimation de la viabilité cellulaire. En effet, celles-ci reposent souvent sur la revification des cellules sur milieu gélosé et comptage des colonies après un temps d'incubation. Le problème fondamental de cette technique repose sur l'utilisation de conditions de culture qui ne sont pas forcément identiques à celle rencontrée au niveau du processus de production. Ce phénomène entraîne une sous-estimation des cellules microbiennes actives rassemblées sous le terme de "viables mais non cultivables". A cela s'ajoutent des problèmes techniques imposés par le temps de remise en culture et l'obtention des résultats bien après que le processus de production soit terminé, ainsi que par des procédures de laboratoire coûteuses en personnel et en consommables. La cytométrie s'impose donc comme une technique de choix qui permet d'analyser les cellules microbiennes individuelles sans étape de remise en culture et avec un débit expérimental élevé. En effet, 30.000 cellules peuvent être analysées en 30 secondes immédiatement après la prise d'échantillon, ce qui permet éventuellement de corriger les conditions de procédés en fonction de l'état des micro-organismes. L'utilisation de fluorochromes spécifiques permet l'analyse de caractéristiques cellulaires. Dans le cas des bactéries lactiques, l'utilisation du couple de colorant "carboxyfluorescéine diacétate" / "iodure de propidium" (cFDA/PI) est mis en oeuvre en routine pour la détermination de la viabilité cellulaire. L'iodure de propidium pénètre dans les cellules ayant une membrane endommagée et les colore en rouge, tandis que le cFDA est un composé non fluorescent qui diffuse au travers de toutes les membranes cellulaires et est hydrolysées par les activités estérases intracellulaires pour donner un composé fluorescent vert. Ces deux composantes de fluorescence peuvent être facilement caractérisées par analyse multi paramétrique au niveau d'un cytomètre en flux. La difficulté majeure que rencontre l'application de la cytométrie en flux au niveau industriel réside dans l'interprétation des résultats. Dans ce travail, trois souches de bactéries lactiques ayant des sensibilités différentes au stress de procédé ont été mise en oeuvre dans des schémas de production industriels faisant intervenir les étapes suivantes : production en bioréacteur agité de 2m³, récolte par centrifugation continue, congélation et lyophilisation. L'analyse par cytométrie en flux montre des tendances fondamentalement différentes pour les trois types de micro-organismes. Les deux souches microbiennes plus sensibles au stress de procédé du fait de leur caractère anaérobie strict ou microaérophile montrent des sous-populations bien distinctes au niveau des cytogrammes, tandis que la souche plus résistante ne montre qu'une seule population évoluant suivant les étapes du procédé. Ces observations sont utilisées pour une meilleure interprétation des cytogrammes pour l'estimation de la viabilité cellulaire en conditions de procédé. Une meilleure interprétation peut également être obtenue en considérant la possibilité de relargage des produits de dégradation fluorescents provenant de l'hydrolyse du cFDA en fonction de l'état de la membrane cellulaire. [less ▲]

Detailed reference viewed: 79 (19 ULg)
Full Text
Peer Reviewed
See detailEfficiency of a Lactobacillus plantarum-xylanase combination on growth performances, microflora populations, and nutrient digestibilities of broilers infected with Salmonella Typhimurium
Vandeplas, Sabrina ULg; Dubois Dauphin, Robin ULg; Thiry, Christophe ULg et al

in Poultry Science (2009), 88(8), 1643-1654

Three experiments were performed to assess the ability of a Lactobacillus plantarum probiotic combined with a xylanase to reduce the effects of S. typhimurium infection in broiler chickens from 1- to 30 ... [more ▼]

Three experiments were performed to assess the ability of a Lactobacillus plantarum probiotic combined with a xylanase to reduce the effects of S. typhimurium infection in broiler chickens from 1- to 30- or 42-d-old. Chicks were challenged at 3-d-old with 108 or 105 cfu S. typhimurium/chick. Four diets were studied: a wheat-based diet (C+) supplemented with 0.1 g/kg xylanase (E), or 106 cfu/g or L. plantarum (P), or both (PE). Uninfected chicks fed the C diet were used as negative control (C-). Six or 8 chicks were housed per cage with 9 cages/treatment. Growth performance and feed conversion ratio (FCR) were recorded weekly. In experiment 1, bacterial enumeration in caeca was achieved using the fluorescent in situ hybridization technique. Salmonella enumeration was realized in excreta by microbiological cultures (Exp. 2 and 3). Nutrient digestibilities and AMEn were determined in experiment 3 from d 35 to d 39. Infection with S. typhimurium led to a significant decrease in the daily weight gain (DWG) by 23.6% to 32.8%, whereas FCR was increased by 1.0% to 19.7%. Chickens fed the PE diet showed significantly improved performance in comparison with C+ birds (DWG: +12.5% in Exp. 1; FCR: -2.1-8.6%), and in comparison with the P and E treatments (DWG: +6.3-8.3% in Exp. 1; FCR: -2.7-6.4%). In experiment 3, the FCR was significantly improved by 3% with the PE diet in comparison with C- chickens. The PE combination tended to restore a microflora similar to that of uninfected broilers, whereas the P and E diets had less of an effect on the profile of bacterial communities. At slaughter age, Salmonella contamination was reduced by 2.00 and 1.85 log cfu for the E and PE treatment, respectively. The PE diet significantly reduced the crude fat digestibility by 9.2%, in comparison with the C+ chickens. These results suggest that combination between L. plantarum and a xylanase as feed additive could be effective for reduction of detrimental effect following S. typhimurium infection of broilers. [less ▲]

Detailed reference viewed: 159 (51 ULg)
Full Text
Peer Reviewed
See detailLyophilized Preparations Of Bacteriocinogenic Lactobacillus Curvatus And Lactococcus Lactis Subsp Lactis As Potential Protective Adjuncts To Control Listeria Monocytogenes In Dry-Fermented Sausages
Benkerroum, N.; Daoudi, A.; Hamraoui, T. et al

in Journal of Applied Microbiology (2005), 98(1),

Methyl oleate was used as a primary carbon source and as an alternative inducer for the production of an extracellular lipase, Lip2, in Y. lipol.vtica strain LgX64.81 grown in a 20-1 bioreactor. The ... [more ▼]

Methyl oleate was used as a primary carbon source and as an alternative inducer for the production of an extracellular lipase, Lip2, in Y. lipol.vtica strain LgX64.81 grown in a 20-1 bioreactor. The lipase-encoding gene, LIP2, was investigated during culture on methyl oleate using a pLIP2-LacZ reporter fusion and we provide evidence for the involvement of methyl oleate in its regulation. [less ▲]

Detailed reference viewed: 31 (5 ULg)